EVALUATION OF THE PROSPECTS OF USING LACTIC ACID BACTERIA STRAINS FROM SILAGE FOR FERMENTATION OF ANIMAL RAW MATERIALS
EVALUATION OF THE PROSPECTS OF USING LACTIC ACID BACTERIA STRAINS FROM SILAGE FOR FERMENTATION OF ANIMAL RAW MATERIALS
Abstract
The ability of three strains of lactic acid bacteria isolated from silage to ferment meat raw materials: mutton and chicken was studied. Different degrees of acid formation under the conditions of meat raw material ranking for different strains were found. Among the tested lactic acid bacteria, the highest acidification rate was found for the strain Lactiplantibacillus plantarum AG1 on both mutton and chicken meat raw materials. The same strain showed greater proteolytic activity compared to Limosilactobacillus fermentum AG8 and Lacticaseibacillus rhamnosus AG16. Taking into account the results obtained, this strain Lactiplantibacillus plantarum AG1 can be recommended as an additional component in the ensemble of starter cultures for the meat industry.
1. Введение
В технологии ферментированных мясных изделий часто используется такие ингредиенты, как постная свинина, свиной задний жир, соль и специи , . Эти ингредиенты набиваются в натуральную свиную оболочку, а затем ферментируются и созревают в контролируемых условиях. Характеристики готовых колбас зависят от метаболической активности штаммов бактерий в процессе созревания. На состав бактериального сообщества влияет инокулированная закваска. Использование стартовых культур повышает качество и безопасность традиционных мясных продуктов. Различные физические и химические условия, такие как pH, температура и питательные вещества, также влияют на физико-химические и сенсорные качества колбас. Ферментированные колбасы – это мясные продукты, в которых молочнокислые бактерии (МКБ) используются в качестве пробиотической стартовой культуры в период созревания колбасы, что снижает pH, изменяет первичную микрофлору, миофибриллярные белки студня, текстуру и улучшает другие органолептические свойства за счет выработки молочной кислоты . Традиционно в качестве стартовых культур для мясных продуктов рассматривают бактерии родов Lactobacillus sakei, Staphylococcus carnosus или Staphylococcus xylosus (PrestoSTART), также к ним могут добавить Pediococcus acidilactici (SafePro FLORA ITALIA LC) или Penicillium nalgiovense (Bactoferm Mold-600). Однако мировая тенденция в научных исследованиях расширяет эти границы, предлагая использовать более широкий круг бактерий, в том числе с пробиотическими свойствами. Например, рядом авторов показана высокая эффективность ферментации мяса лактобактериями видов Lactoplantibacillus plantarum, Liminolactobacillus fermentum , , . Кроме кислотообразования лактбактерии способны менять ароматическую композицию пищевых продуктов, что важно с точки зрения органолептических свойств .
Ранее нами были охарактеризованы пробиотические свойства молочнокислых бактерий, выделенных из силоса , их видовая принадлежность определена, они относятся к видам Lactoplantibacillus plantarum, Liminolactobacillus fermentum и Lacticaseibacillus rhamnosus.
2. Методы и принципы исследования
В работе использовали штаммы Lactiplantibacillus plantarum AG1, Limosilactobacillus fermentum AG8, Lacticaseibacillus rhamnosus AG16 (ранее идентифицированный как L. fermentum), выделенные из силоса и описанные ранее . Культивирование их осуществляли на среде МРС и МРС агар (Himedia, Индия). Для инокулирования в фаршевые системы готовили ночную культуру бактерий, для чего в колбу с 20 мл МРС добавляли 20 мкл суспензии штаммов и культивировали 16 ч при 38 °С без перемешивания. Затем стерильно центрифугировали суспензию 10 мин при 4500 об/мин, культуральную жидкость сливали, а биомассу клеток ресуспендировали, получившуюся суспензию использовали для инокулирования мясного фарша.
Для проверки возможности использования штаммов для ферментирования мяса курицы и баранины были изготовлены восемь групп модельных фаршевых систем. Четыре модели были изготовлены из грудки курицы (Пестречинка, РФ) и четыре модели из мякоти баранины (Мираторг, РФ), мясное сырье было куплено в местных супермаркетах. Мясо курицы или баранины измельчали и добавляли хлорид натрия (25 г/кг фарша), сахарозу (40 г/кг), и 500 мг/кг NaNO3. По три группы были опытными: AG1 – инокулировали Lactiplantibacillus plantarum AG1, AG8 – инокулировали Limosilactobacillus fermentum AG8, и AG16 – инокулировали Lacticaseibacillus rhamnosus AG16. Для стратовых культур использовали суспензию приблизительно 106 КОЕ/г фарша, добавляли соответственно в фарш и тщательно перемешивали. Каждая фаршевая система содержала 80 г. Затем фарш ферментировали в течение 48 ч при 30 °C и относительной влажности 80% в термостате. После этого фарши созревали в течение 7 дней при температуре 13-15 °C и относительной влажности 65-70% в климатической камере.
Белок, жир, влага были определены на анализаторе инфракрасном ИнфраЛЮМ ФТ (Санкт-Петербург, РФ) по калибровочной кривой «мясной продукт». рН измеряли в водной вытяжке (5 г фарша смешивали с 45 мл дистиллированной воды).
Статистический анализ. Для сравнения средних значений полученных результатов использовали t-тест, p > 0,05 для незначимых различий. Все эксперименты проводились в трех повторностях, в работе таблице и рисунках показаны средние значения со стандартным отклонением. Расчеты по работе осуществлялись с помощью программного обеспечения MS Excel 2009.
3. Основные результаты
Изменения рН мясных фаршей в процессе ферментации и созревания представлены на рисунке 1. Начальные значения pH в контрольной и заквасочных группах составляли 7,36 в случае баранины и 6,66 в случае использования куриной грудки. Показатель рН значительно различался между контрольной и заквасочными группами через 48 ч ферментации. В случае баранины pH в группе AG1 был самым низким, на уровне 5,55 ед, в группе AG8 – чуть выше 5,72. Штамм AG16 проявлял низкую кислотообразующую способность, через 2 суток ферментации показатель рН снизился до 6,41 ед.
В случае куриной грудки наибольшая кислотообразующая активность была при использовании штамма L. plantarum AG1, к сожалению штаммы L. fermentum AG8 и L. rhamnosus AG16 оказались менее активны. Снижение pH связано с накоплением органических кислот, вырабатываемыми МКБ, прежде всего молочной кислотой. Интенсивное снижение pH на начальном этапе может обеспечить безопасность ферментированных мясных изделий. Процессы подкисления различались между двумя используемыми видами мяса. Кроме того, выявлены различия в ферментации в зависимости от вида бактерий. Наибольшая эффективность присуща L. plantarum AG1. В других исследованиях высокая эффективность подтверждена для L. plantarum в смешанных заквасочных культурах на подкисленных колбасах в процессе ферментации , .
Рисунок 1 - Изменение рН баранины (А) и курицы (Б) при ферментации или созревании с использованием разных штаммов лактобактерий
Количество животного жира в процессе ферментации увеличилось, что обусловлено снижением влажности, при этом в случае баранины не выявлено существенных различий между контрольным и опытными образцами фаршевых систем. Что касается курицы, то содержание жира в опытных образцах на 2% больше, чем в контрольном, что может быть обусловлено меньшей влажностью опытных вариантов.
Таблица 1 - Химические показатели фаршевых систем из баранины или курицы после созревания с использованием разных молочнокислых бактерий
Образец | Баранина | Курица | ||||
Жир, % | Белок, % | Влажность, % | Жир, % | Белок, % | Влажность, % | |
Исходные показатели фаршей до внесения бактериальной закваски | ||||||
Начальная | 13,23±0,12 | 16,01±0,11 | 71,05±1,25 | 6,41±0,11 | 22,14±0,15 | 70,83±1,11 |
Показатели после созревания (9 сут) | ||||||
Контроль | 16,40±0,13 | 17,11±0,15 | 63,17±1,11 | 7,57±0,09 | 29,66±0,15 | 63,58±1,12 |
AG1 | 16,70±0,08 | 15,00±0,10 | 63,14±1,09 | 9,73±0,11 | 27,03±0,14 | 61,82±1,15 |
AG8 | 16,27±0,20 | 16,43±0,14 | 63,48±1,15 | 9,58±0,12 | 27,58±0,22 | 62,03±0,98 |
AG16 | 16,86±0,15 | 16,94±0,13 | 61,83±1,06 | 9,59±0,13 | 28,56±0,14 | 59,23±1,12 |
Полученные результаты свидетельствуют о разном уровне кислотообразования и реализации протеолитического потенциала в условиях мясного сырья. Выявлено, что наиболее перспективным с точки зрения подкисления мяса, особенно не традиционного для сыровяления как баранина, является штамм L. plantarum AG1, он же проявляет наибольшую протеолитическую активность. О возможности применения молочнокислых бактерий вида Lactiplantibacillus plantarum свидетельствуют другие авторы. Например, для штамма L. plantarum 3-19 показана высокая скорость снижения рН, а также способность снижать накопление нежелательных биогенных аминов на 30% в процессе изготовления сыровяленных изделий из свинины . В настоящее время мясные продукты также рассматриваются как матрица для доставки пробиотических бактерий в организм человека, в частности L. plantarum BFL , L. rhamnosus LR32 200B и L. plantarum LP115 400B использовались для получения колбас типа салями. Ранее нами показано, что используемые в нашей работе штаммы МКБ обладают пробиотическими свойствами , , что, в свою очередь, расширяет горизонты исследования и использования МКБ в составе заквасок для мясной отрасли.
4. Заключение
С точки зрения перспективы использования исследованных штаммов в полноценной технологии необходимы исследования поведения коммерческих стартевых культур с интродукцией L. plantarum AG1 или других культур, в том числе пробиотических, что будет являться целью дальнейших исследований. В перспективе предполагается провести партию сыровяленых цельномышечных изделий из баранины и курицы с применением разных коммерческой закваски, в которую будет в разных пропорциях добавлены новые штаммы. Такой подход даст основания для составления оптимальной композиции молочнокислых бактерий для мясной отрасли. Работы в области биотехнологии заквасочных композиций с новыми российскими штаммами являются актуальными и востребованными с точки зрения импортозамещения и обеспечения продовольственной безопасности.