Влияние мочевины, обработанной культурой B.S. Ч-13, на накопление рутина в различных сортообразцах гречихи, выращенной в агроклиматических условиях Московской области
Влияние мочевины, обработанной культурой B.S. Ч-13, на накопление рутина в различных сортообразцах гречихи, выращенной в агроклиматических условиях Московской области
Аннотация
В статье приводятся результаты мелкоделяночных опытов, направленных на изучение содержания рутина в двух сортах гречихи, выращенных на разном уровне азотного питания. Эксперименты поставлены на территории Московской области в 2023–2024 гг. В качестве объекта исследования выбраны два сорта гречихи: Дикуль и Даша. Выявлены особенности накопления рутина в сухой биомассе и лузге гречихи в агроклиматических условиях Московской области, в т.ч. при системе применения микробного удобрения, содержащей культуру B.s. Ч-13. В работе проводится детальный анализ зависимости накопления рутина от содержания питательных веществ NPK (азота, фосфора и калия) в сухой биомассе и лузге растений гречихи. Это позволяет лучше понять механизмы накопления рутина и разработать рекомендации по оптимизации условий выращивания гречихи для получения более высоких концентраций этого полезного вещества.
1. Введение
Гречиха — ценная крупяная культура, берущая своё начало с горных районов Восточной Азии. Центр происхождения культуры накладывает определенные биологические особенности на ценные сельскохозяйственные признаки растений. Зерновые продукты играют важную роль в полноценном и здоровом питании человека, поскольку они являются источниками энергии, макро- и микроэлементов, доступных для всех групп населения
. Химический состав и пищевая ценность гречневой крупы характеризуется широким диапазоном колебаний количественного содержания компонентов . В последнее время растет интерес к гречихе как к важному лекарственному растению: благодаря высокому содержанию рутина её используют для сохранения функционирования сердечно-сосудистой системы человека . Кроме того, рутин также является эффективным сенсибилизатором при противоопухолевой терапии .Рутин не обнаружен в злаках и псевдозлаках, за исключением гречневой крупы, которая может быть использована в качестве хорошего источника диетического рутина
. В ряде работ отмечено, что на метаболизм фенилпропаноидов влияют различные абиотические и биотические факторы, в т.ч. и УФ-излучение от солнца . Исследования S. Kreft (2002) показали, что листья гречихи, выращенные в условиях повышенного УФ-излучения, содержали на 97% больше рутина, чем в условиях пониженного УФ-излучения. Рутин играет важную роль в защите растений от радиационного повреждения и противостоянии абиотическому стрессу благодаря своим антиоксидантным свойствам и способен поглощать УФ-излучение . Благодаря своей значительной реакционной способности флавоноиды участвуют в процессах фотосинтеза, дыхания, роста, размножения и защиты от различных стрессов . Показано, что семядоли являются важными местами накопления рутина в гречихе .В России проведены исследования, показывающие, что на уровень накопления рутина в гречихе можно влиять. Например, изучено влияние регуляторов роста Люрастима и Модуса на содержание рутина в крупе и семенных оболочках гречихи посевной сортов Молва и Темп; оба регулятора роста увеличивали содержание рутина
. В культуре тканей гречихи показано влияние кинетина на 20-кратное увеличение содержания рутина . Имеются исследования, показывающие положительное влияние эндофитных грибов (Bionectria pityrodes, Fusarium oxysporum, Alternaria sp.) на рост ростков и синтез рутина в гречихе . Исследований, показывающие влияние бактерий на синтез фенольных соединений в зерновых культурах, в т.ч. гречихе проведено недостаточно.Одним из подходов, повышения урожайности культур является использование бактерий, способствующих росту растений (PGPB), и эта тенденция, несомненно, продолжается, учитывая многочисленные публикации в научных журналах
. Присутствие бактерий в почве и тканях растений может изменить уровень фитогормонов, что неизбежно приведет к изменениям в росте, развитии растений и их способности управлять стрессом . Bacillus subtillis — типичный представитель PGPB. Эндофитные микроорганизмы, к котором относится Bacillus subtillis Ч-13, в сельском хозяйстве получили широкое распространение и являются хорошей стратегией для решения проблем современного сельского хозяйства, таких как снижение производственных затрат с меньшим воздействием на окружающую среду без ущерба для производительности .В литературных источниках нет данных, описывающих влияние B.s. Ч-13 на накопление рутина гречихой во взаимосвязи с внесением различных доз азотных удобрений, в частности карбамида. Исследования Bo Deng (2019 г.) показывают, что доступность азота и последующее изменение внутреннего минерального баланса могут существенно влиять на накопление флавоноидов в растениях, например, у Cyclocarya paliurus
. В свою очередь, Yuanli Li (2023 г.) большее количество флавоноидов у белой акации (Robinia pseudoacacia) на ранних этапах роста и развития синтезировалось при недостатке азота . Daocheng Ma и др. (2024 г.) заключают, что различные внутренние и внешние факторы могут влиять на биосинтез и накопление растительных флавоноидов .Dacheng Hao в исследовании акцентирует внимание на том, что умеренное внесение N в почву в целом повышает урожайность и содержание фитометаболитов в лекарственных культурах, но чрезмерное внесение N имеет противоположный эффект
. Выводы Hao (2024 г.) подтверждаются исследованиями Mohd Hafiz Ibrahim (2011 г.) который показывает, что по мере снижения уровня N продукция флавоноидов в лабизии карликовой (Labisia pumila Blume) увеличивается . Таким образом, высокие дозы азотных удобрений угнетают синтез флавоноидов в растениях.Данных исследований штамма Bacillus subtillis на накопление флавоноидов (рутин и др.) растениями гречихи в открытых литературных источниках нет. Выращивание гречихи сокращается во всем мире в течение последних двух-трех десятилетий из-за низкой и неустойчивой урожайности
. Одна из причин невысокой урожайности гречихи — слабая отзывчивость на использование приёмов интенсивного земледелия . Отличие гречихи от зерновых культур заключается в растянутости периода цветения, который совпадает с интенсивным линейным ростом побегов . Основным отходом сельскохозяйственного производства гречихи является лузга. До сих пор лузга не нашла применения в промышленности за исключением незначительного её использования для производства фурфурола, а также как заменителя деревянной доски путём дорогостоящего её прессования . Эффективность внесения удобрений под гречиху зависит от агроклиматической характеристики региона возделывания, почвенных особенностей, количества и состава удобрений . Отзывчивость гречихи на внесение удобрений обуславливается высокой потребностью в элементах питания, поскольку культура выносит из почвы большое количество калия и других питательных веществ. Урожайность гречихи в значительной степени коррелирует с фотосинтетической способность, которая зависит от системы азотных удобрений и густоты посадки . Адаптивная стратегия гречихи основана на способности к длительному интенсивному росту: образование семян в количествах, необходимых, обеспечивается благодаря сильно выраженной ремонтантности .Таким образом, фокус нашего исследования сосредоточен на способности культуры гречихи накапливать рутин в соломе и лузге под воздействием азотных удобрений в чистом виде, и обработанных культурой B.s. Ч-13. Задачами исследования были определение оптимальных доз азотного удобрения и биомодифицированного азотного удобрения культурой B.s. Ч-13 обеспечивающих максимальное содержание рутина в соломе и лузгой гречихе; определение теоретических зависимостей меду накоплением рутина и динамикой азота, фосфора и калия в соломе и лузге растений гречихи; определение выхода рутина с единицы посевной площади.
2. Методы исследования
Опыты по установлению содержания рутина в сортообразцах гречихи проведены в 2023–2024 гг. в г. Орехово-Зуево, Московская область. Полевые мелкоделяночные опыты заложены на дерново-подзолистой глееватой легкосуглинистой почве. Общая площадь посевов гречихи 0,01 га, учетная площадь делянки 0,95 м2. Повторность опытов четырехкратная.
Основные агрохимические свойства почвы опытного участка (среднее 2023–2024 гг.): рН(сол.) = 6,83 (нейтральные), Нг = 2,86 мг *экв /100 г почвы, S = 7,66 мг*экв /100 г почвы, содержание N-NO3 (0–20 см) = 5,18 мг/кг почвы, N-NH4 = 3,03 мг/кг почвы, подвижного P2O5 (по Кирсанову) = 181 мг/кг почвы (V класс обеспеченности), K2O (по Кирсанову) = 134 мг/кг почвы (IV класс — повышенное содержание), Nобщ. = 0,07%, гумус (по Тюрину в модификации Симакова) — 2,63%, Nщ.г. (по Тюрину и Кононовой) = 32,5 мг/кг (II класс — низкое).
Для определения основных агрохимических показателей почвы использовались стандартные методики: обменной кислотности рН(сол.) по ГОСТ 26483-85, гидролитической кислотности (Нг) по ГОСТ 26212-2021 по методу Каппена в модификации ЦИНАО с помощью 1 н. раствора СН3СООNa, определение суммы поглощенных оснований в почве по Каппену – Гильковицу (ГОСТ 27821-2020), содержание N-NO3 в почве определялось колориметрическим методом с дисульфофеноловой кислотой с использованием коэффициента 0,226 для пересчета содержания нитратов (NO3-) в нитратный азот (N-NO3) в водной вытяжке, определение содержания аммонийного азота в почве осуществлялось колориметрическим методом по Е.В. Аринушкиной с использованием реактива Несслера при рН>7 (0,778 — коэффициент пересчета содержания аммония (NH4) в аммонийный азот (N-NH4), содержание минерального азота (Nмин) – математическим методом как сумму нитратного и аммонийного форм азота. Определение содержания подвижного фосфора и обменного калия в почве по методу Кирсанова, фосфор – колориметрическим методом, калий — пламенно-фотометрическим методом. Содержание общего азота (Nобщ.) по ГОСТ Р 58596-2019. Гумус по методу И.В. Тюрина в модификации В.Н. Симакова с использованием 0,2%-ного раствора фенилантрониловой кислоты (C13H11NO2). Определение легкогидролизуемого азота по Тюрину и Кононовой с обработкой почвы 0,5 н раствором H2SO4. Колориметрическое определение содержания подвижных форм азота осуществлялось на спектрофотометре марки ЭКОВЬЮ В-1200. Определение азота, фосфора и калия в образцах растений (лузга и солома) осуществлялось по стандартным методикам. Азот по методу Кьельдаля, фосфор и калий на пламенном фотометре.
Схема опыта включала два фактора. Фактор А - система удобрения, фактор B — система биомодифицированного удобрения, в качестве фона применялся сульфат калия (K2SO4) в дозе 60 кг/га (К60). В качестве азотного удобрения применялся карбамид (NH2)2CO в следующих концентрациях: N30, N60 и N90. Те же самые дозы карбамида подвергались биомодификации микробным удобрением, содержащим Bacillus subtilis штамм Ч-13 (B.s. Ч-13). Биомодификация (NH2)2CO осуществлялась вручную из расчета 1 мл B.s. Ч-13 на 1 г карбамида. Затем обработанное удобрение подвергалось суточной инкубации в факторостатных условиях при температуре 25 °C и без доступа света. После этого удобрения вручную вносили на опытные участки.
Определение рутина в соломе гречихи проводили после обмолота. Определение содержания рутина в лузге гречихи проводили после обрушения зерна растений гречихи.
Перед проведением анализа соломы и лузги растений закладывался опыт по установлению влажности исследуемого материла. Для этого 2 г. растительного сырья помещали в стеклянный бюкс, предварительно доведенный до постоянной массы, и высушивали в сушильном шкафу при t=105℃. При установлении содержания рутина в соломе и лузге гречихи в качестве объекта исследования выбраны водно-спиртовые вытяжки из растений. Перед определением аналитическую пробу сырья измельчали до размера частиц, проходящих через сито с диаметром отверстий 2 мм. Далее 1 г. растительного сырья помещали в коническую колбу объёмом 250 мл, приливали 70% C2H5OH, присоединяли к холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 30 минут. После охлаждения фильтровали в мерную колбу объёмом 250 мл. Экстракцию повторяли трижды. Экстракты объединяли.
Перед проведением анализа замеряли объем извлечения. Далее 5 мл 70% раствора C2H5OH помещали в пробирку и приливали 3–4 мл исследуемой вытяжки. Раствором сравнения служил 70% этанол. Измеряли оптическую плотность исследуемых растворов на спектрофотометре марки Portlab 511 UV/Vis Spectrophotometer при длине волны 361 нм (λ=361 нм), используя кювету с толщиной слоя 10 мм. Содержание рутина в лузге и соломе гречихи определяли по формуле 1. Полученный результат в % пересчитывали на мг/г вещества.
Формула 1. Определение рутина в пересчете на абсолютно-сухое вещество листьев и лузги гречихи, %:
где А — оптическая плотность исследуемого раствора; D — оптическая плотность раствора стандартного образца (216,65), Vизв. — объем извлечения (мл), Vразв. — объём разведения, m — масса навески, W% — влажность растительного материала, Vалик. — объем аликвоты, взятой для проведения анализа.
Объектом исследования выступили два сорта растений гречихи: Дикуль (2001) и Даша (2018), контрастно различающиеся по ряду показателей. Сорт Даша отличается от сорта Дикуль экономным габитусом соцветия и может обеспечивать высокую урожайность без применения удобрений. Вызревшие растения гречихи убирали вручную, раздельными способом при побурении 75% плодов (9 сентября 2023 г., и 10 сентября 2024 г.), урожай учитывали поделяночно. Полученные данные по урожайности культуры обрабатывали методом двухфакторного дисперсионного анализа с повторениями с использованием программы Excel в пересчете на базисную влажность 14%. Методом визуального наблюдения (при появлении у 75% растений качественного признака) фиксировалось наступление фенологических фаз. Отбор образцов листьев проведен во вторую декаду цветения растений.
Проведен корреляционный анализ накопления рутина в соломе (X) в зависимости от содержания NPK в соломе и корреляционный анализ между урожайностью культуры (Х) и накопление рутина в лузге гречихи.
Агроклиматические условия выращивания (2023–2024 гг.) характеризовались как зоны обеспеченного увлажнения. ГТК за тёплый период времени по формуле Г.Т. Селянинова в 2023 г. — 1,3 (зона обеспеченного увлажнения), в 2024 г. — 1,44 (зона обеспеченного увлажнения) (рис. 1). Отметим, что сбор растений проведен 18 июля в годы проведения опытов.

Рисунок 1 - Климатические условия по месяцам в годы проведения исследования
Максимальная средняя температура за месяц зафиксирована в 2023 г. и наблюдалась в августе, температура в июле составляла 18,9℃. В 2024 г. максимальная температура в июле — 22,1 ℃, что на 3,2 ℃ больше, чем в аналогичном периоде в 2023 г. 18 июля 2023 г. температура составляла 20,7 ℃, в 2024 г. — 23,7 ℃.
3. Результаты исследований
Наблюдения показали, что при применении азотных удобрений в агроклиматических условиях Московской области вегетационный период гречихи увеличивается до 105–106 дней при максимальной дозе (NH2)2CO (90 кг/га) и при обработке карбамида культурой B.S. Ч-13. Стадия цветения гречихи выступает самой продолжительной фенологической фазой в вегетационном периоде растений. Гречиха цветет вплоть до уборки урожая. Именно фаза цветения является критической для гречихи по причине высокой нуждаемости в питательных веществах в почве.
Направленное действие трех факторов: абиотический, биотический и антропогенный – обеспечит более хорошее завязывание плодов и уменьшит количество пустых, засохших завязей. К абиотическому фактору в первую очередь следует отнести количество питательных веществ в почве, а затем погодно-климатические условия и, безусловно, скорость ветра. Ведущим биотическим фактором выступает количество и качество энтомофауны в посевах гречихи, в том числе пораженность посевов вредителями, бактериальными и вирусными болезнями. К антропогенному фактору относится соблюдение агротехники культуры в тех или иных агроклиматических условиях.
Отметим, что в годы проведения опытов гречиха не поражалась ни бактериальными, ни вирусными заболеваниями специфическими для культуры. Известно, что флавоноиды участвуют в защите растений от воздействия неблагоприятных факторов внешней среды: повышенной интенсивности света, низких и высоких температур, тяжелых металлов, водного дефицита
. Соответственно, при наличии благоприятных условий среды содержание флавоноидов в гречихе может снижаться.А.Г. Клыков приходит к выводу о том, что роль рутин вместе с другими флавоноидами участвует в приспособлении растений к неблагоприятным условиям произрастания . Следовательно, содержание рутина в зеленой массе гречихи может служить биомаркером условий её выращивания. Наибольшее количество рутина накапливается в листьях и соцветиях, оно может быть выше более чем в 10 раз по сравнению со стеблем
. В литературе показано, что из вегетативной массы гречихи посевной можно получить рутина 22,45 кг/га, рентабельность может составить 35% .Азот, фосфор и калий определялись после уборки растений гречихи исследуемых сортов, определение NPK в лузге гречихи производилось после обрушения зерна. Лузга — это побочный продукт, который содержит значительное количество питательных веществ и может быть использован в качестве органического удобрения. Полученные данные о содержании NPK в лузге анализируют и интерпретируют с учётом особенностей исследуемых сортов гречихи и условий их выращивания (табл. 1).
Таблица 1 - Содержание рутина в соломе гречихи
Вариант | Содержание рутина, мг/г | |||
2023 | 2024 | |||
Дикуль | Даша | Дикуль | Даша | |
Контроль | 67,5 | 67,5 | 58,0 | 66,8 |
K60 | 59,3 | 64,6 | 50,5 | 61,8 |
K60+N30 | 65,8 | 69,4 | 63,8 | 67,9 |
K60+N60 | 66,8 | 55,8 | 66,2 | 58,0 |
K60+N90 | 44,3 | 61,4 | 56,8 | 66,8 |
K60+N30m | 77,8 | 57,3 | 68,1 | 60,5 |
K60+N60m | 61,5 | 66,5 | 63,8 | 65,6 |
K60+N90m | 59,3 | 72,8 | 67,2 | 70,7 |
НСР05АБ | 1,4 | 1,3 | 1,3 | 1,4 |
НСР05А | 3,0 | 3,0 | 2,8 | 3,3 |
НСР05Б | 1,9 | 1,9 | 1,8 | 2,1 |
В ходе проведения исследований получены данные, которые показывают влияние азотных удобрений на содержание рутина в изучаемых сортах, в т.ч. удобрений, обработанных культурой B.s. Ч-13. В 2023 г. по сорту Дикуль установлено, что при повышении концентрации азотных удобрений до 60 кг/га наблюдается увеличение содержания рутина в соломе, при дозе 90 кг/га содержание рутина резко падает (-36,7%).
Возможно, при высоких дозах мочевины в почве гречиха теряет способность эффективно противостоять факторам, которые негативно влияют на её жизнедеятельность, что приводит к снижению урожайности культуры, вследствие увеличения вегетативной массы. Более того, отмечено положительное влияние карбамида, обработанного B.s. Ч-13, на содержание рутина в гречихе в дозе 30 кг/га, увеличение относительно контроля составляет 15%. При применении биомодифицированных удобрений наблюдается та же тенденция сокращения концентрации рутина в соломе гречихи сорта Дикуль.
Применение калийных удобрений (K60) в сочетании с различными дозами азотных удобрений (N30, N60, N90) показывает, что эффект от удобрений может варьироваться в зависимости от сорта и агроклиматических условий периода возделывания. Например, у сорта Дикуль добавление N30 к K60 в 2024 году привело к увеличению содержания рутина до 63,8 мг/г, тогда как у сорта Даша при тех же условиях содержание рутина составило 67,9 мг/г. Это указывает на то, что сорта гречихи по-разному накапливают рутин в агроклиматических условиях Московской области.
Варианты с применением B.s.-13 показывают, что модификация доз удобрений (мочевины) может влиять на содержание рутина в соломе гречихи. Например, для сорта Дикуль в варианте K60+N30m в 2024 году содержание рутина составило 68,1 мг/г, что выше, чем в варианте без B.s. Ч-13 (K60+N30 — 63,8 мг/г). Это может указывать на то, что модифицированные удобрения способствуют более высокому накоплению рутина. Для оптимизации содержания рутина важно учитывать как дозы и типы удобрений, так и генетические особенности сортов.
В 2023 г. прослеживается сортоспецифичность накопления рутина в соломе гречихи сорта Даша. При применении биомодифицированных удобрений концентрация кверцетин-3-О-рутинозида в соломе у растений сорта Даша возрастает, в отличие от растений сорта Дикуль. Максимальная концентрация рутина у растений сорта Даша отмечена на варианте опыта с удобрением, обработанным культурой B.s. Ч-13, увеличение относительно контроля составляет 6%. В целом, в годы исследований растения гречихи сорта Даша накапливали рутин больше, чем растения гречиха сорта Дикуль. В агроклиматических условиях 2024 г. обнаружена схожая тенденция по растениям сортов Дикуль и Даша. Влияние азотных удобрений на гречиху специфично, поэтому выяснение механизмов влияния азотного удобрения на растения требует дальнейшей проработки вопроса оптимизации азотного питания культуры.
Применение B.s. Ч-13 может способствовать более эффективному усвоению азота растениями, особенно при высоких дозах азотных удобрений. В вариантах с применением B.s. Ч-13 (K60 + N30m, K60 + N60m, K60 + N90m) наблюдается увеличение содержания азота по сравнению с вариантами без применения B.s. Ч-13. Это может указывать на то, что B.s. Ч-13 способствует более эффективному усвоению азота растениями гречихи (табл. 2).
Таблица 2 - Содержание NPK в соломе и лузге гречихи сорта Дикуль
Вариант | Продукция | Содержание NPK, % | |||||
2023 | 2024 | ||||||
N | P2O5 | K2O | N | P2O5 | K2O | ||
Дикуль | |||||||
Контроль | Лузга | 0,54 | 0,038 | 0,08 | 0,55 | 0,038 | 0,08 |
Солома | 0,83 | 0,41 | 0,93 | 0,81 | 0,41 | 0,91 | |
K60 | Лузга | 0,55 | 0,038 | 0,09 | 0,55 | 0,039 | 0,09 |
Солома | 0,84 | 0,43 | 1,89 | 0,89 | 0,44 | 1,85 | |
K60+N30 | Лузга | 0,61 | 0,036 | 0,09 | 0,61 | 0,037 | 0,09 |
Солома | 0,82 | 0,45 | 1,65 | 0,84 | 0,45 | 1,74 | |
K60+N60 | Лузга | 0,63 | 0,036 | 0,08 | 0,63 | 0,039 | 0,09 |
Солома | 0,82 | 0,46 | 1,98 | 0,83 | 0,44 | 1,96 | |
K60+N90 | Лузга | 0,64 | 0,037 | 0,1 | 0,63 | 0,038 | 0,1 |
Солома | 0,83 | 0,54 | 1,88 | 0,83 | 0,52 | 1,91 | |
K60+N30m | Лузга | 0,63 | 0,038 | 0,09 | 0,63 | 0,038 | 0,09 |
Солома | 0,84 | 0,44 | 1,64 | 0,85 | 0,43 | 1,67 | |
K60+N60m | Лузга | 0,64 | 0,04 | 0,09 | 0,64 | 0,039 | 0,09 |
Солома | 0,85 | 0,44 | 1,77 | 0,85 | 0,44 | 1,90 | |
K60+N90m | Лузга | 0,64 | 0,04 | 0,1 | 0,65 | 0,040 | 0,1 |
Солома | 0,89 | 0,43 | 1,80 | 0,91 | 0,47 | 1,88 | |
НСР05 | Лузга | 0,02 | 0,004 | 0,01 | 0,02 | 0,004 | 0,01 |
Солома | 0,05 | 0,04 | 0,1 | 0,04 | 0,04 | 0,1 | |
НСР05А | Лузга | 0,04 | 0,01 | 0,02 | 0,05 | 0,01 | 0,02 |
Солома | 0,1 | 0,07 | 0,2 | 0,1 | 0,08 | 0,2 | |
НСР05Б | Лузга | 0,03 | 0,006 | 0,01 | 0,03 | 0,006 | 0,05 |
Солома | 0,06 | 0,05 | 0,1 | 0,06 | 0,05 | 0,1 |
Зависимость может проявляться вследствие того, что рутин может влиять на процессы транспорта веществ в растениях гречихи, включая азота. Например, рутин может изменять проницаемость клеточных мембран или участвовать в метаболических путях, связанных с азотом. Погодные условия, тип почвы, уровень освещённости и другие внешние факторы могут влиять на содержание рутина и азота в соломе гречихи. Например, стресс от засухи или высоких температур может изменить метаболизм рутина и его влияние на содержание азота (табл. 3).
Таблица 3 - Содержание NPK в соломе и лузге гречихи сорта Даша
Вариант | Продукция | Содержание NPK, % | |||||
2023 | 2024 | ||||||
N | P2O5 | K2O | N | P2O5 | K2O | ||
Даша | |||||||
Контроль | Лузга | 0,55 | 0,037 | 0,08 | 0,55 | 0,038 | 0,08 |
Солома | 0,83 | 0,42 | 0,94 | 0,82 | 0,43 | 0,94 | |
K60 | Лузга | 0,55 | 0,037 | 0,09 | 0,55 | 0,038 | 0,09 |
Солома | 0,85 | 0,45 | 1,86 | 0,82 | 0,45 | 1,83 | |
K60+N30 | Лузга | 0,62 | 0,036 | 0,09 | 0,62 | 0,038 | 0,09 |
Солома | 0,85 | 0,45 | 1,69 | 0,83 | 0,45 | 1,70 | |
K60+N60 | Лузга | 0,64 | 0,039 | 0,08 | 0,64 | 0,04 | 0,08 |
Солома | 0,85 | 0,46 | 1,89 | 0,85 | 0,46 | 1,87 | |
K60+N90 | Лузга | 0,64 | 0,037 | 0,1 | 0,65 | 0,039 | 0,1 |
Солома | 0,87 | 0,5 | 1,83 | 0,87 | 0,49 | 1,83 | |
K60+N30m | Лузга | 0,64 | 0,039 | 0,09 | 0,65 | 0,04 | 0,09 |
Солома | 0,88 | 0,44 | 1,73 | 0,89 | 0,44 | 1,74 | |
K60+N60m | Лузга | 0,65 | 0,04 | 0,09 | 0,65 | 0,041 | 0,09 |
Солома | 0,87 | 0,44 | 1,79 | 0,88 | 0,45 | 1,80 | |
K60+N90m | Лузга | 0,60 | 0,039 | 0,1 | 0,67 | 0,041 | 0,1 |
Солома | 0,89 | 0,45 | 1,81 | 0,9 | 0,45 | 1,82 | |
НСР05 | Лузга | 0,02 | 0,004 | 0,01 | 0,03 | 0,005 | 0,01 |
Солома | 0,03 | 0,02 | 0,1 | 0,04 | 0,02 | 0,1 | |
НСР05А | Лузга | 0,06 | 0,1 | 0,02 | 0,06 | 0,01 | 0,02 |
Солома | 0,08 | 0,009 | 0,2 | 0,1 | 0,06 | 0,2 | |
НСР05Б | Лузга | 0,04 | 0,1 | 0,01 | 0,04 | 0,007 | 0,01 |
Солома | 0,05 | 0,006 | 0,1 | 0,07 | 0,04 | 0,1 |
Проведенный корреляционно-регрессионный анализ свидетельствует о слабом влиянии кубической степени содержания рутина на содержание азота в соломе гречихи сорта Дикуль. Это означает, что при значительном увеличении содержания рутина, влияние этого компонента начнет проявляться сильнее, потенциально вызывая увеличение содержания азота. Отрицательное значение при X указывает на то, что при увеличении содержания рутина, влияние квадратичного члена будет снижать содержание азота. Таким образом, доминирующим будет линейное влияние, что приведет к увеличению содержания азота. Например, если содержание рутина в соломе увеличивается с 0 до 10 мг/г, можно ожидать увеличение содержания азота примерно на 5,5 мг/г. Уравнение можно использовать для прогнозирования содержания азота в соломе гречихи на основе содержания рутина (рис. 2).

Рисунок 2 - Зависимость между содержанием азота (Y) и содержанием рутина (X) в траве гречихи
Примечание: среднее 2023 – 2024 гг.
Фосфор является важным компонентом нуклеотидов, которые служат строительными блоками ДНК и РНК. Он также входит в состав АТФ (аденозинтрифосфата) — основного источника энергии в клетках. Фосфор участвует в различных метаболических путях, включая гликолиз, цикл Кребса и окислительное фосфорилирование, которые обеспечивают клетку энергией. Рутин — это флавоноид, который обладает антиоксидантными свойствами и может защищать клетки от окислительного стресса. Метаболические процессы, включая синтез и накопление рутина, зависят от доступности различных элементов, включая фосфор. Понимание метаболизма фосфора может помочь выявить механизмы, влияющие на накопление рутина в растениях гречихи.
Количество рутина в соломе гречихи сорта Дикуль меняется нелинейно в зависимости от уровня фосфора. Это свидетельствует о сложном характере взаимосвязи между содержанием рутина и фосфора в соломе, а также о возможном существовании оптимального количества фосфора, при котором достигается максимальное содержание рутина. Параболическая зависимость с отрицательным коэффициентом при квадратичном члене указывает на существование максимального уровня содержания рутина, который достигается при определенном содержании фосфора. После этого уровня дальнейшее увеличение фосфора приводит к снижению содержания рутина. При малых концентрациях фосфора в соломе гречихи наблюдается положительное влияние на содержание рутина. Это может быть связано с тем, что фосфор играет важную роль в метаболических процессах растений, включая синтез флавоноидов, к которым относится рутин.
Высокие концентрации фосфора могут оказывать негативное влияние на содержание рутина, что может быть связано с нарушением баланса питательных веществ или изменением физиологических процессов в растении. Закономерности подчёркивают сложность взаимосвязи между содержанием фосфора, и рутина в соломе и указывают на необходимость дальнейшего изучения факторов, влияющих на эту зависимость, для оптимизации агротехнических приёмов и повышения содержания полезных веществ в растения (рис. 3). Различия в коэффициентах уравнений могут указывать на генетические и физиологические особенности сортов, влияющих на их реакцию на изменение содержания фосфора.

Рисунок 3 - Зависимость между содержанием фосфора (X) и содержанием рутина (Y) в траве гречихи
Примечание: среднее 2023 – 2024 гг.
Наблюдается слабая связь между содержанием калия и рутина по сорту растений гречихи Дикуль и Даша. Низкий коэффициент детерминации говорит о том, что существует множество других факторов, которые оказывают значительное влияние на содержание рутина в соломе гречихи. Хотя калий не может быть основным фактором, влияющим на содержание рутина, он всё же играет важную роль в физиологических процессах. Содержание рутина может зависеть не только от калия, но и от других элементов, таких как фосфор, азот, магний и т. д. Их взаимодействие и баланс могут оказывать более значительное влияние на накопление рутина, чем уровень калия в отдельности (рис. 4).

Рисунок 4 - Зависимость между содержанием калия (X) и содержанием рутина (Y) в траве гречихи
Примечание: среднее 2023 – 2024 гг.
Главным показателем количества и качества применяемых удобрений является урожайность культуры. Урожайность гречихи в условиях Московской области не стабильна и зависит от множества факторов; основные факторы — свет, тепло и минеральное питание. Ввиду того, что агроклиматические условия вегетационных периодов 2023 г. и 2024 г. различны, различается и урожайность культуры, но некоторые общие тенденции возможно проследить.
Максимальная урожайность гречихи сорта Дикуль в 2023 г. составляет 15,9 ц/га на варианте опыта K60+N60m. Отметим, что при повышении дозы (NH2)2CO уменьшается урожайность культуры, эффект от B.s. Ч-13 не значителен. По сорту Даша наблюдается схожая тенденция, что и по сорту Дикуль, максимальная урожайность зафиксирована на варианте опыта K60+N30m. В 2024 г. урожайность культуры в целом ниже, чем в 2023 г. В 2024 г. по сорту Дикуль и Даша наблюдается максимальная урожайность на варианте опыта K60+N60m. Увеличение относительно контроля 47,3% по сорту Дикуль, 59,3% по сорту Даша. Урожайность гречихи сорта Дикуль была лучше, чем урожайность гречихи сорта Даша в годы проведения исследований (рис. 5).

Рисунок 5 - Урожайность гречихи в условиях Московской области
Таблица 4 - Содержание рутина в плодовых оболочках гречихи
Вариант | Содержание рутина, мг/г | |||
2023 | 2024 | |||
Дикуль | Даша | Дикуль | Даша | |
Контроль | 6,8 | 8,4 | 7,7 | 7,1 |
K60 | 7,5 | 13,7 | 5,9 | 12,4 |
K60+N30 | 11,5 | 13,7 | 13,4 | 12,6 |
K60+N60 | 6,8 | 16,2 | 11,1 | 14,3 |
K60+N90 | 7,0 | 5,9 | 8,2 | 9,7 |
K60+N30m | 13,8 | 6,0 | 8,4 | 7,6 |
K60+N60m | 16,4 | 6,1 | 15,8 | 9,5 |
K60+N90m | 6,1 | 14,4 | 7,8 | 13,4 |
НСР05АБ | 1,5 | 0,4 | 0,6 | 0,4 |
НСР05А | 3,4 | 0,9 | 1,5 | 0,9 |
НСР05Б | 2,1 | 0,5 | 0,9 | 0,6 |
В целом в плодовых оболочках гречихи сорта Даша содержится больше рутина, чем в плодовых оболочка гречихи сорта Дикуль. Максимальное накопление рутина плодовыми оболочками по сорту Дикуль зафиксировано в 2023 г. на варианте опыта с применением биомодифицированного карбамида (K60+N60m). Растения гречихи сорта Даша максимально накапливают рутин на варианте опыта K60+N90m. В 2024 г. плодовые оболочки сорта Дикуль накапливали рутин по аналогичной тенденции с 2023 г., а по сорту Даша максимальное накопление наблюдалось на варианте опыта без применения B.s. Ч-13. Накопление рутина плодовыми оболочками гречихи может находиться во взаимосвязи с урожайностью зерна (рис. 6).

Рисунок 6 - Зависимость между урожайностью зерна (Х) и содержанием рутина в плодовых оболочках гречихи
Полиномиальное уравнение шестой степени, описывающее зависимость между урожайностью зерна и содержание рутина в плодовых оболочках гречихи по сорту Даша, показывает, что увеличение урожайности не всегда приводит к пропорциональному увеличению содержания рутина. Вероятно, здесь большое значение приобретает генетический фактор накопления рутина в различных частях растения, поэтому разработка сортов гречихи с высоким содержанием рутина является перспективным направлением для исследований.
Урожайность соломы в зависимости от дозы азотных удобрений возрастает, соответственно, при учете густоты стояния растений получаем конечный выход рутина в единицы посевной площади (табл. 5). Варианты с биомодифицированными удобрениями (K60+N30m, K60+N60m, K60+N90m) показывают различные результаты по выходу рутина. В некоторых случаях (K60+N30m) выход рутина выше, чем в вариантах с обычными удобрениями, что может указывать на положительный эффект от биомодификации. Однако в других случаях (K60+N90m) эффект не так выражен.
Таким образом, оптимальная доза азота 30 кг/га, биомодифицированные удобрения эффективнее при высоких дозах мочевины. Калийное удобрение в дозе 60 кг/га положительно влияет на выход рутина. Существует обратная зависимость между дозой азота и содержанием рутина. Обратная зависимость между дозой (NH2)2CO и содержанием рутина означает, что с увеличением дозы азота содержание рутина в биомассе растений снижается. В варианте К60+N30 (доза азота — N30) содержание рутина составляет 67,9 мг/г. В варианте К60+N60 (доза азота увеличена до N60) содержание рутина снижается до 58,0 мг/г. В варианте К60+N90 (ещё большая доза азота — N90) содержание рутина снова составляет 66,8 мг/г, что ниже, чем в варианте с меньшей дозой азота (К60+N30). Эти данные подтверждают, что увеличение дозы азота может приводить к снижению содержания рутина в сухой биомассе растений гречихи.
Таблица 5 - Урожайность сухой биомассы и сбор рутина с гречихи в фазу цветения
Вариант | 2023 | 2024 | ||||||
Дикуль | Даша | Дикуль | Даша | |||||
Сухая биомасса, т/га | Рутин, ц/га | Сухая биомасса, т/га | Рутин, кг/га | Сухая биомасса, т/га г/раст. | Рутин, кг/га | Сухая биомасса, т/га | Рутин, кг/га | |
Контроль | 4,9 | 3,3 | 5,8 | 3,9 | 5,0 | 3,9 | 5,8 | 3,8 |
K60 | 6,7 | 3,9 | 8,3 | 5,4 | 6,7 | 5,4 | 8,5 | 5,3 |
K60+N30 | 8,3 | 5,5 | 8,4 | 5,8 | 8,4 | 5,9 | 8,6 | 5,8 |
K60+N60 | 9,5 | 6,4 | 7,7 | 4,3 | 9,8 | 4,3 | 8,0 | 4,7 |
K60+N90 | 9,2 | 4,0 | 6,7 | 4,1 | 9,0 | 4,2 | 7,2 | 4,8 |
K60+N30m | 8,1 | 6,3 | 6,8 | 3,9 | 8,8 | 3,9 | 6,9 | 4,2 |
K60+N60m | 9,5 | 5,8 | 7,8 | 5,2 | 9,9 | 5,2 | 7,9 | 5,2 |
K60+N90m | 8,7 | 5,2 | 7,9 | 5,8 | 9,0 | 5,8 | 7,9 | 5,6 |
НСР05АБ | 0,2 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,8 | 0,1 | 0,6 | 0,1 |
НСР05А | 0,5 | 0,3 | 0,4 | 0,2 | 1,6 | 0,4 | 1,2 | 0,4 |
НСР05Б | 0,3 | 0,2 | 0,3 | 0,1 | 1,2 | 0,2 | 0,8 | 0,1 |
Варианты с более высокими дозами азота (N60 и N90) показывают меньшую эффективность по сравнению с N30. Это может свидетельствовать о том, что превышение оптимальной дозы азота не только не приносит дополнительного увеличения выхода рутина, но и может снижать его содержание в биомассе, что подтверждается обратной зависимостью между дозой азота и содержанием рутина. Данные таблицы подтверждают положительное влияние удобрений на урожайность и содержание рутина в гречихе, но также указывают на сложность и неоднозначность этих зависимостей, зависящих от дозы удобрений, их типа и сорта растения.
4. Заключение
Таким образом, в ходе проведенного исследования можем говорить о влиянии биомодифицированного азотного удобрения на накопление рутина в соломе и лузге гречихи.
Увеличение конечного выхода рутозида из растительного сырья гречихи сорта Дикуль и Даша связано с увеличением развитием вегетативных органов растений гречихи при применении азотных удобрений и культуры B.s. Ч-13, что определяется генетическими факторами, регулирующие формирование вегетативного аппарата. В растениях гречихи фосфор необходим для синтеза флавоноидов, поэтому и обнаруживается более тесная корреляционная связь между содержание P2O5 и рутина в соломе гречихи.
Определение уровня рутина в растениях помогает оценить состояние посевов и обнаружить возможные проблемы в их росте и развитии. Максимальный выход рутина у гречихи сорта Дикуль в 2023 и 2024 гг. наблюдается на варианте опыта с применением карбамида, обработанного B.s. Ч-13, в дозе 90 кг/га, аналогично и по гречихе сорта Даша. В условиях Центрального Нечерноземного региона России накопление рутина в соломе гречихи сорта Дикуль составляет 44,3 … 77,8 мг/г, у сорта Даша 55,8 … 72,8 мг/г. Исследование содержания рутина в плодовых оболочках гречихи позволяет рассматривать лузгу как перспективное сырье для фармацевтического производства препаратов на основе рутозида.
В 2023 году при использовании варианта K60+N30m содержание рутина составило 6,3 кг/га для сорта Дикуль, что выше, чем при использовании K60+N30 (5,5 кг/га). Однако для сорта Даша содержание рутина было ниже — 3,9 кг/га по сравнению с 5,8 кг/га при использовании K60+N30. В 2024 году для сорта Дикуль при применении K60+N30m содержание рутина составило 3,9 кг/га, что ниже, чем 5,9 кг/га при использовании K60+N30. Для сорта Даша содержание рутина при использовании K60+N30m также было ниже (4,2 кг/га) по сравнению с K60+N30 (5,8 кг/га). Процентные колебания содержания рутина при применении B.s. Ч-13 варьируются в широком диапазоне: от снижения на 33,9% до увеличения на 41,5% (K60+N90m). Это подчёркивает сложность и многообразие факторов, влияющих на эффективность применения биомодифицированного (NH2)2CO. Например, для растений гречихи сорта Дикуль в 2024 году на варианте опыта K60+N30m привела к снижению содержания рутина на 33,9%, в то время как для растений гречихи сорта Даша в том же году модификация K60+N90m увеличила содержание рутина на 16,7%.
Влияние различных доз карбамида на содержание рутина неоднозначно: увеличение дозы (NH2)2CO не всегда приводит к пропорциональному увеличению содержания рутина. В некоторых случаях высокие дозы азота приводят к снижению содержания рутина.