1. Введение
В период импортозамещения и утверждённой Доктрины продовольственной безопасности нашей страны известно, что одной из главных задач рыбохозяйственного комплекса Российской Федерации является обеспечение населения качественной и доступной отечественной рыбной продукцией. Это в полной мере относится к Крайнему Северо-Востоку России. Североохотские популяции различных видов промысловых рыб поражены болезнями различной этиологии. Но наиболее важное значение имеет распространение инфекционных, в частности, бактериальных болезней проходных лососёвых рыб.
Современная экосистема в естественных водоемах, а также постоянно меняющиеся условия содержания рыб в аквакультуре, приводят к возникновению новых болезней и проявлений новых форм известных заболеваний, таких как аэромоноз, псевдомоноз и другие. Актуальность профилактики, ранней диагностики и мониторинга данных заболеваний обусловлена значительным ущербом рыбному хозяйству в результате массовой гибели рыб [1], [2], [3], [4].
В настоящее время в аквакультуре нашей страны широко применяется профилактика аэромоноза, основанная на систематическом мониторинге этиологической структуры возбудителей аэромоноза [4].
В таком огромном регионе, как Крайний Северо-Восток России, впервые проведены целенаправленные исследования по выяснению эпизоотологической значимости рыб в решении проблем аквакультуры.
Цель исследований – обеспечение усовершенствования методов диагностики бактериальных болезней лососёвых рыб на рыбоводных предприятиях области с использованием ретроспективных данных. В задачи исследований входило изучение бактериальных болезней рыб и оценка эпизоотологической обстановки на нерестовых реках и на рыбоводных предприятиях.
2. Материал и методы
С 1994 по 2021 гг. нами проводился многолетний мониторинг изучения бактериальных болезней проходных тихоокеанских лососёвых. Материалом для исследования послужили 3 вида рыб: кета, горбуша, кижуч естественных водоёмов акватории Охотского моря и оплодотворённая икра, личинки, молодь проходных лососёвых рыб.
Исследован 2051 экземпляр проходных тихоокеанских лососевых рыб и 447 проб оплодотворённой икры, личинок и молоди на реках-нерестилищах и рыбоводных предприятиях. Рыбу для исследований вылавливали из рек Яма, Армань, Ола, Яна, Ланковая, Иреть и др.
Сбор материала осуществлялся в летний период в июне-августе в экспедиционных условиях на реках-нерестилищах в период анадромной миграции рыбы, а на рыбоводных предприятиях (Ольская ЭПАБ, Арманский и Янский рыбоводные заводы) – в осенний и зимний период.
Ихтиопатологические исследования выполняли в соответствии с общепринятыми методиками в условиях лаборатории [5]. Бактериологические исследования проводились в соответствии с традиционными методами [6], [7], [8]. Видовую принадлежность микроорганизмов определяли в соответствии с определителем [9]. Статистическая обработка результатов проведена на основе общепринятых методик с использованием табличного редактора MicrosoftExcel.
3. Результаты и их обсуждение
Во время экспедиционных выездов в сезон нереста рыбы нами проводилось эпизоотологическое обследование рек-нерестилищ, а рыбоводных предприятий – круглогодично. В настоящее время в северной части Охотского моря функционирует три рыбоводных завода, которые занимаются искусственным воспроизводством лососёвых видов рыб.
Перед вскрытием рыбу осматривали на наличие клинических признаков. В результате выявлены малоподвижные особи кеты, горбуши и кижуча с покрасневшими участками на теле, кровоизлияниями в области брюшка и у основания брюшных плавников, эрозиями и воспалением вокруг рта, вздутием живота, геморрагиями и некрозом плавников, пучеглазием, ерошением чешуи и множественными гнойниками на поверхности кожи (преимущественно ниже средней линии тела рыбы).
При патолого-анатомическом вскрытии обнаруживали размягчение почки, увеличение селезёнки, некроз и кровоизлияния в мышцах, кишечнике, асцит в брюшной полости.
Посевы выполняли из крови, внутренних органов и невскрывшихся абсцессов на чашки Петри со средой МПА и полужидкий агар Клодницкого, на котором хорошо развиваются аэробы и анаэробы и уменьшается проявление антагонизма при развитии микробных ассоциаций. Эти среды мы использовали для первичных полевых посевов и накопления бактериальной массы для последующих более полных лабораторных исследований, проводимых на специальных средах. Посевы выдерживали при температуре 18-25 °С в течение 24-48 часов. Патогенность аэромонад определяли по степени ДНК-азной активности.
В результате бактериологических исследований половозрелых особей из крови и внутренних органов, а также оплодотворённой икры, личинок и молоди при искусственном рыборазведении выделены бактерии Aeromonashydrophila и Pseudomonascapsulata. На основании клинического осмотра, патолого-анатомического вскрытия, результатов бактериологического исследования и определения патогенности аэромонад по степени ДНК-азной активности у горбуши, кеты и кижучана естественных нерестилищах установлен аэромоноз и псевдомоноз. Степень заражённости рыб смотрите ниже (рис. 1, рис. 2).
С целью ранней диагностики аэромоноза и псевдомоноза был отработан метод их ранней диагностики, заключающийся в отборе проб и выполнении бактериологического исследования оплодотворённой икры непосредственно перед закладкой в инкубационные аппараты. Бактериологический посев также выполнялся как с поверхности, так и из содержимого икринок, желточного мешка личинок и брюшной полости молоди [10].
Заражённость аэромонозом проходных лососёвых рыб на естественных нерестилищах
Одновременно проводился отбор проб воды, питающей рыбоводные объекты, и выполнялось её бактериологическое исследование.
Заражённость псевдомонозом проходных лососёвых рыб на естественных нерестилищах
Установлены пути передачи инфекции: при отборе половых продуктов на реках-нерестилищах от производителей больных аэромонозом и псевдомонозом; с оплодотворённой икрой при перевозке на рыбоводные предприятия и закладке на инкубацию.
4. Заключение
В результате проведённых научно-иссследовательских работ у кеты, кижуча, горбуши естественных популяций северного Приохотья (в границах Магаданской области) впервые установлен аэромоноз и псевдомоноз проходных лососёвых рыб, вызванные патогенными бактериями Aeromonashydrophila и Pseudomonascapsulata. Эпизоотологическая ситуация по аэромонозу и псевдомонозу признана неблагополучной. Усовершенствован метод диагностики бактериальных болезней лососёвых рыб на рыбоводных предприятиях области.